C18色譜柱的分離原理是基于反相色譜技術(shù)。在反相色譜中,填料表面是由親水基團(tuán)(比如硅膠)修飾而成的,在有機(jī)溶劑中具有相對疏水性。而C18色譜柱中的填料表面經(jīng)過烷基化修飾,使其具有更高的疏水性。在樣品溶液中,疏水性化合物的分子與填料表面的疏水區(qū)域相互作用較強(qiáng),因而在色譜柱中停留時間較長;而相對親水的化合物與疏水區(qū)域的相互作用較弱,因此在柱中停留時間較短。因此,當(dāng)樣品溶液通過C18色譜柱時,親水性化合
2023/08 Vink
C18色譜柱是一種常見的反相色譜柱。C18是指該色譜柱固定相上的化合物是八十八烷基化硅膠。反相色譜主要用于分離和分析極性化合物,通常使用有機(jī)溶劑作為流動相,而水作為弱溶劑。C18色譜柱在生化、藥物和環(huán)境等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用,能夠有效分離和測定許多化合物。
2023/08 Vink
反相柱的固定相極性指的是固定相與溶液中分離物質(zhì)之間的親疏關(guān)系。在反相柱中,固定相通常選擇具有疏水性的材料,如C18,C8等碳鏈結(jié)構(gòu)。疏水性固定相對親水性分離物具有較強(qiáng)的吸附作用,因此可以有效地分離非極性物質(zhì)。相反,對于極性分離物質(zhì),反相柱的固定相則表現(xiàn)出一定的親和性。在此情況下,親和性固定相能夠吸附并與極性分離物質(zhì)發(fā)生相互作用,從而實現(xiàn)分離??傊?,反相柱的固定相極性選擇取決于待分離化合物的極性特征
2023/08 Vink
反相柱是通過將固定相填充到柱子中來完成裝載的。下面是一般的反相柱裝載步驟:1. 準(zhǔn)備柱子:選擇合適尺寸的柱子,并確保柱子干燥和無污染。2. 準(zhǔn)備固定相:根據(jù)需要選擇合適的反相固定相材料(如C18),并將其加入到一個干燥的容器中。3. 處理固定相:固定相需要經(jīng)過活化處理,以去除不純物質(zhì)和活化劑。這可以通過重復(fù)洗滌和干燥來完成。4. 充填柱子:將處理好的固定相填充到柱子中??梢允褂弥犹畛湓O(shè)備或手工操
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反相柱的極性較大的化合物在柱子中的保留時間相對較短,因此它們通常會先出峰。較大極性的化合物在反相柱上與柱子的非極性固定相相互作用較弱,因此在洗脫過程中很快地被洗脫出來。反相柱的固定相通常是由含有親油基團(tuán)(如碳鏈或苯環(huán))的非極性化合物構(gòu)成的。在反相柱上,較極性的化合物與非極性固定相之間的作用力較弱,容易從柱子上洗脫下來。與此相對應(yīng)的是,極性較小的化合物與非極性固定相之間的作用力較強(qiáng),容易被固定相保留
2023/07 Vink
反相柱的上樣量沒有規(guī)定的固定值,而是根據(jù)柱子的尺寸、樣品類型、分析目的和儀器要求等因素來確定。一般來說,上樣量應(yīng)該在柱子承受范圍內(nèi),并且要保持在柱子的線性范圍內(nèi),以避免過載或損壞柱子。一般情況下,常規(guī)分析中的上樣量在微克至毫克范圍內(nèi),對于一般的HPLC柱,上樣量通常在1-10微克之間。對于高靈敏度的分析或特定樣品的分析,上樣量可能會低于1微克。同時,在上樣過程中也應(yīng)考慮樣品的溶解度,不要過量上樣導(dǎo)
2023/07 Vink
反相柱和正相柱是兩種常見的色譜柱類型,它們在分析樣品時有一些重要的區(qū)別。1. 原理不同: 反相色譜是基于液體相對于固定相而言具有較強(qiáng)極性的原理,常用的固定相是疏水性的碳鏈;而正相色譜是基于液相對固相而言具有較弱極性的原理,常用的固定相是親水性的硅膠或氨基硅膠。2. 選擇性不同: 由于反向和正相柱的固定相性質(zhì)不同,它們對樣品的選擇性也不同。反相柱通常用于非極性或中等極性的化合物,而正相柱則更適用于極
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