液相色譜洗脫能力的強弱受到多種因素的影響,包括流動相的極性、固定相的特性、樣品的性質(zhì)和色譜條件等。在反相色譜中,流動相的極性越大,洗脫能力越弱。因為在這樣的系統(tǒng)中,樣品是極性化合物,更愿意與色譜柱中的填料結(jié)合。流動相中極性比較大的組分,比如水,更像是勇敢的肌肉猛男;而色譜柱中填料,比如C18,更像是甜甜的奶油小生。樣品如果喜歡看韓劇,就會愿意在柱子里多待一會,因為肌肉男對它沒有吸引力。換一種情況,
2023/11 Vink
在反相色譜中,流動相的極性參數(shù)越大,出峰越早。這是因為在反相色譜中,固定相的極性較小,與極性物質(zhì)的結(jié)合力較弱,因此極性物質(zhì)在固定相中的保留較弱,也就越早出峰。相反,流動相的極性參數(shù)越大,與極性物質(zhì)的結(jié)合力越強,物質(zhì)在流動相中的保留時間越長,出峰越晚。
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液相色譜中峰拖尾的原因可能有以下幾點:1. 柱篩板堵塞:這可能是由于流動相污染、流動相或試品溶液不潔凈、手動閥門使用不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致。此時,解決辦法是反沖色譜柱或更換篩板。2. 流動相或試品被污染:流動相或試品如果被污染,也可能導(dǎo)致峰拖尾。此時,解決辦法是更換流動相或試品。3. 流動相的pH值不適當(dāng):如果流動相的pH值過高或過低,可能會導(dǎo)致峰拖尾。此時,解決辦法是調(diào)整流動相的pH值。4. 樣品中存在干擾
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在堿性流動相中進行反相色譜分離,通常需要添加離子對試劑。這些試劑通常是強酸和強堿,如鹽酸、氫氧化鈉、磷酸等,可以與樣品中的堿性化合物形成穩(wěn)定的離子對。然而,添加離子對試劑時,需要考慮流動相的pH值對離子對形成的影響。通常情況下,離子對試劑的pH值應(yīng)該控制在2.5-3.5之間,以確保流動相中的試劑處于離子對形成的最佳pH值。這是因為,當(dāng)流動相的pH值較低時,離子對試劑可以形成穩(wěn)定的陽離子,可以與樣品
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如果發(fā)現(xiàn)緩沖液的緩沖能力不夠,可以嘗試以下方法:1. 重新評估緩沖對的范圍:確保所選擇的緩沖對在PKa±1以內(nèi)。如果緩沖對的范圍不正確,可以重新選擇合適的緩沖對,并重新配置緩沖溶液。2. 增加緩沖液的濃度:如果緩沖液的濃度過低,可以嘗試增加其濃度,以提高緩沖能力。但是,也要注意不要超過緩沖對的范圍。3. 更換緩沖劑:如果發(fā)現(xiàn)使用的緩沖劑質(zhì)量有問題或者已經(jīng)過期,可以嘗試更換新的緩沖劑。4. 加入額外
2023/11 Vink
在色譜分析中,pH值起著至關(guān)重要的作用。特別是在高效液相色譜(HPLC)分析中,流動相的pH值對色譜柱的穩(wěn)定性、分離的選擇性以及色譜峰的對稱性都產(chǎn)生重要影響。1. 對色譜柱的影響:流動相的pH值可以影響色譜柱的穩(wěn)定性。在某些情況下,如果pH值不合適,可能會導(dǎo)致色譜柱失去穩(wěn)定性,影響分離效果。2. 對分離選擇性的影響:流動相的pH值也可以影響分離的選擇性。對于可離子化的極性酸堿化合物來說,pH值的影
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色譜柱固定相是色譜分離中的關(guān)鍵部分,它決定了色譜柱的選擇性和分離效果。固定相可以是固體或液體,通常與色譜柱載體結(jié)合使用。常見的固定相包括硅膠、氧化鋁、聚合物等。硅膠是一種常用的固定相,具有高比表面積和良好的化學(xué)穩(wěn)定性,適用于多種樣品的分離。氧化鋁具有高選擇性,適用于特定樣品的分離。聚合物固定相則具有高柱效和高分離度等優(yōu)點。在選擇固定相時,需要考慮樣品的性質(zhì)、分離要求以及固定相的穩(wěn)定性等因素。同時,
2023/10 Vink
色譜柱載體在色譜分離過程中扮演著重要的角色。載體是化學(xué)惰性的固體顆粒,為固定液提供了一個惰性表面,使固定液以薄膜狀態(tài)均勻分布在其表面上。載體可分為硅藻土載體與非硅藻土載體。硅藻土類載體:這類載體通常用于氣相和液相色譜法,具有高比表面積和良好的化學(xué)穩(wěn)定性。硅藻土是一種天然的、多孔的、高比表面積的載體材料,廣泛用于液相色譜中。非硅藻土類載體:這類載體通常用于高效液相色譜法,具有高選擇性、高柱效和高分離
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