c18色譜柱沖洗方法
2023-08-17
Vink
在使用C18色譜柱進行分析后,為了保護色譜柱和清洗殘留的化合物,可以進行沖洗步驟。下面是常見的C18色譜柱沖洗方法:
1. 洗脫劑法:使用有機溶劑如甲醇、乙腈等作為洗脫劑,可以迅速將柱內(nèi)殘留的化合物洗出。常見的洗脫劑用法是將有機溶劑與流動相以一定的比例混合,例如80%甲醇/20%水。將洗脫劑以較高流速(例如1-2 mL/min)通過色譜柱沖洗,通常持續(xù)沖洗10-20分鐘。
2. 稀酸法:在某些情況下,使用稀酸溶液(如0.1%三氟乙酸)可以更徹底地清洗色譜柱。將稀酸溶液以較高流速通過色譜柱,持續(xù)沖洗10-20分鐘。
在進行沖洗時,建議將流動相流速稍微增加,但不要超過色譜柱的最大允許流速。此外,如果需要更徹底地清洗色譜柱,可以進行多次沖洗。
最后,注意沖洗后,應(yīng)將色譜柱再次平衡至分析條件的初始條件,以確保下一次分析的準確性和重復(fù)性。