色譜定量方法對(duì)比
色譜定量方法主要有以下三種:
1. 歸一化法:把所有出峰的組分含量之和按100%計(jì)的定量方法。各成分校正因子一致時(shí)可用該法,該法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,特別是進(jìn)樣量不容易準(zhǔn)確控制時(shí),進(jìn)樣濃度及進(jìn)樣量的變化的影響很小。其他操作條件,如流速、柱溫等變化對(duì)定量結(jié)果的影響也很小。
2. 外標(biāo)法(標(biāo)準(zhǔn)曲線法、直接比較法):首先用欲測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。具體作法是:用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列,在與欲測(cè)組分相同的色譜條件下,等體積準(zhǔn)確量進(jìn)樣,測(cè)量各峰的峰面積或峰高,用峰面積或峰高對(duì)樣品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,此標(biāo)準(zhǔn)工作曲線應(yīng)是通過原點(diǎn)的直線。若標(biāo)準(zhǔn)工作曲線不通過原點(diǎn),說(shuō)明測(cè)定方法存在系統(tǒng)誤差。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的斜率即為絕對(duì)校正因子。當(dāng)欲測(cè)組分含量變化不大,并已知這一組分的大概含量時(shí),也可以不必繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,而用單點(diǎn)校正法,即直接比較法定量。
3. 內(nèi)標(biāo)法:選擇適宜的物質(zhì)作為欲測(cè)組分的參比物,定量加到樣品中去,依據(jù)欲測(cè)組分和參比物在檢測(cè)器上的響應(yīng)值(峰面積或峰高)之比和參比物加入的量進(jìn)行定量分析的方法稱為內(nèi)標(biāo)法。內(nèi)標(biāo)法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標(biāo)物。
以上三種色譜定量方法各有其特點(diǎn)和使用范圍,應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件和需求選擇合適的方法。