正確使用高效液相色譜柱的關鍵
正確使用高效液相色譜柱的關鍵步驟包括:
1. 過濾流動相和樣品:在注入樣品和流動相之前,應進行過濾,以避免雜質(zhì)和顆粒物進入色譜柱,造成堵塞或損壞。
2. 正確選擇流動相:流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中或長時間保留在柱中。流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果。同時,降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命。流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應,如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。流動相沸點不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導致實驗無法進行。
3. 保護柱:在加裝保護柱的同時,應確保保護柱與分析柱粒徑一致或稍大,這樣可以延長色譜柱的使用壽命。
4. 避免過高的柱壓:過高的柱壓會導致色譜柱壽命縮短。為了避免過高的柱壓,可以采取降低流速、使用流速梯度或手動進樣閥等方式。
5. 正確及時的沖洗:在樣品分析結束后,應進行充分的沖洗,以去除殘留在色譜柱中的雜質(zhì)和污染物,為下次分析做好準備。
6. 注意溫度和酸堿度:溫度和酸堿度對色譜柱的分離效果和壽命都有一定影響。應遵循色譜柱的使用說明,合理控制溫度和酸堿度。
7. 脫氣:在流動相配制好后,一定要進行脫氣處理。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
8. 避免使用極端條件:應避免長時間使用高流速或高壓力,以免造成色譜柱過度磨損或損壞。
9. 定期維護和檢查:定期對色譜柱進行檢查和維護,包括檢查色譜柱頭的污染情況、更換填料等,以確保其正常運轉(zhuǎn)。
10. 記錄使用情況:每次使用色譜柱后,應記錄使用情況,包括使用時間、流速、壓力、溫度等參數(shù),以便后續(xù)分析和維護。
遵循以上關鍵步驟,可以確保高效液相色譜柱的正確使用和維護,提高分析結果的準確性和穩(wěn)定性。